【産品名稱】:倉鼠組織蛋白酶KELISA試劑盒
【産(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析
【産(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢(jiǎn)測(cè)方法】:酶免法/酶聯免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨(huò) 期】:1-3天(現(xiàn)貨(huò)供應)
【産品性狀】:液體盒裝
【産(chǎn)品價格】:電議(含稅含運費,我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測(cè))
【ELISA檢測(cè)試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
【銷售優勢】:價格行業優勢、質量可靠、如果出現客觀(guān)質量問題包換(huàn)退
【待檢(jiǎn)樣本】:體液、血清、血漿(jiāng)、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿(jiāng)、心房水标本等
樣品採(cǎi)集:收集标本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天進行檢測的标本,儲存在4℃備(bèi)用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及時分裝後放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反複凍融。标本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類标本需添加抑肽酶。
【産(chǎn)品保質期】:半年(六個(gè)月)
一、倉鼠組織蛋白酶KELISA試劑盒實驗原理:
結合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢标本(抗原或抗體)起反應。用洗滌(dí)的方法洗去未結合的抗原或抗體。再加入酶标記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與标本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化成爲有色産(chǎn)物,産(chǎn)物的量與标本中受檢物質的量直接相關,根據呈色的深淺進行定性或定量分析。根據實際的應用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:将捕獲抗體包被在固相載體上,封閉(bì)後加入待檢抗原,溫育後加入酶标檢測(cè)抗體,捕獲抗體和檢測(cè)抗體可以是針對不同表位的兩種單抗,也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測(cè)抗體需要經過酶标。
競争ELISA:用待檢抗原或抗體去幹擾已經預先設計好的體系,zui終顯色的結果與待檢抗原或抗體的幹擾程度成負相關。主要應用於(yú)隻有一個抗原表位的蛋白檢測(cè)。
多因子ELISA檢測(cè)技術:多重ELISA芯片技術通過在96孔闆的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,随後像ELISA一樣操作,通過化學發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測(cè)。
受刺激的細胞産生的細胞因子是短暫的,並(bìng)且不同細胞因子基因表達的動力學是變化的。通過ELISA實驗隻能檢測到的免疫反應性的細胞因子蛋白的含量,而這並(bìng)不能*代表細胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細胞因子抗體的一種ELISA不能區别如TGF-β1的細胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測部分降解的細胞因子蛋白,它們仍有免疫反應性(例如至少可識别兩個表位),當時它可能卻喪失瞭(le)它們的生物學活性。
二、倉鼠組織蛋白酶KELISA試劑盒操作要點:
1.選擇合适的固相載體;
2.選擇合适的包被緩(huǎn)沖(chōng)液;
3.確定*包被量;
4.加樣準確(què),避免産(chǎn)生氣泡。
三、倉鼠組織蛋白酶KELISA試劑盒優點:
我司共有14000餘種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備(bèi)以下優點(diǎn):
*品質—高品質的抗體和試劑(jì)是ELISA試劑(jì)盒的基礎(chǔ)
精確(què)特異—特異檢測(cè)目标分子,結果精確(què)可重複
高度靈敏—可檢測(cè)到pg/mL級(jí)别的目标
種類齊全—可覆蓋(gài)人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優化設計(jì)—可拆卸式96孔闆(12X8),爲血清、血漿、尿樣和細胞培養物樣本檢測(cè)進行優化
四、常見問題解答
小編(biān)簡單整理瞭(le)5個問題,具體内容如下:
1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?
小編(biān)自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:
1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)标準曲線(xiàn);96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)标準曲線(xiàn)
2)以96T試劑(jì)盒來算,定量的試劑(jì)盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,定性的試劑(jì)盒可以做94個(gè)左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除标準品複(fù)孔檢測(cè),zui多還能檢測(cè)80個标本;48T的zui多30個樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品?闆能重複(fù)利用嗎?
96T,一般做複(fù)孔的話,做标準曲線需要16個(gè)孔,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)闆不能重複(fù)利用。而且配套的試劑也隻是夠一塊闆子用的。
3、想請教一下,我想用elisa法測血清裏的一種抗原,查瞭(le)資料,發現沒有現成的試劑盒用,現在就有2種備選方案,一種是買抗體對自己包被(查瞭(le)R&D等大公司都沒有可用於(yú)elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會不會比國産的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術不錯(cuò)有隊其他公司不放心,可以自己購買抗體對自己包被,這個就是麻煩點,自己包被用著(zhe)放心,舒心;
另外國(guó)内還是有一些資質不錯(cuò)的公司,如上海恒遠,上海勁馬,上海滬鼎等等
4、western 和ELISA 處(chù)理樣(yàng)本有何差别?
Western Blot 樣品制備(bèi)要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然後冰上研磨,收集於(yú)EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多餘的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多於(yú)一次上樣量,一次性用完一支,避免反複凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集於(yú)EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因爲ELISA上樣量基本都是每孔100ul,做複孔,每個樣品2孔,就需要200ul,爲瞭(le)避免不夠2孔,分裝時要大於(yú)200ul每支),直接實驗。多餘的-80保存,一樣避免反複凍融。
不過ELISA少量樣品進行預實驗,或者查閱文獻,看看大概組織裏有多高濃度,選擇合适的試劑盒,測(cè)量範圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測(cè)量不準,或者濃度過低,小於(yú)試劑盒zui低可測(cè)濃度。
5、Elisa試劑(jì)盒該(gāi)買哪家公司的呢?
提出這個問題的朋友其實該打,目前上各個品牌的試劑盒生廠(chǎng)商,都會有其偏重點(diǎn),像R&D在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼,而其他牌子也一樣的。
Bender:粘附分子方面的試(shì)劑(jì)盒;
Cayman:花生四烯酸類産(chǎn)品的試劑(jì)盒;
Merck(Linco):内分泌研究方面的試(shì)劑(jì)盒;
Tips:
1、買Elisa試劑盒時,盡量先查文獻,通過文獻找品牌,再找供應商,找供應商就找正規生産(chǎn)廠(chǎng)家,千萬不要去幹“賠夫人又折兵”的蠢事。
2、ELISA中,複孔就是同一個樣品加到至少兩個孔中(一般3個或4個),zui後取其平均值作爲樣品的讀(dú)數,這樣測(cè)得的結果才有說服力!
做複(fù)孔是爲瞭(le)較好的較少組内差異,如果血清不足不做複(fù)孔也可以。