elisa試劑盒

elisa試劑盒注意事項

1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確(què)結果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用後(hòu)立即冷藏保存試劑(jì)。

2. 洗闆不正確(què)可以導(dǎo)緻不準確(què)的結果。在加入底物前確(què)保盡量吸幹孔内液體。溫育過程中不要讓微孔幹燥掉。

3. 消除闆底殘(cán)留的液體(tǐ)和手指印，否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顔色，已經(jīng)變(biàn)藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑(jì)和标本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。

7. 平衡至室溫後(hòu)再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷闆條上。

8. 任何反應試劑不能接觸(chù)漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期産品。

10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處(chù)理樣品和檢測(cè)裝置。

試劑準備

試劑盒從(cóng)冷藏環境中取出應在室溫平衡後(hòu)方可使用。

20×洗滌(dí)緩沖(chōng)液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

elisa試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min後(hòu)的鋁(lǚ)箔袋中取出所需闆條，剩餘闆條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置标準品孔和樣本孔，标準品孔各加不同濃(nóng)度的标準品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标準品孔和樣(yàng)本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）标記的檢測抗體100μL，用封闆膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍幹(gàn)，每孔加滿洗滌(dí)液（350μL），靜置1min，甩去洗滌(dí)液，吸水紙上拍幹，如此重複(fù)洗闆5次（也可用洗闆機洗闆）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min内，在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結果計算

以所測标準品的OD值爲橫坐标，标準品的濃度值爲縱坐标，在坐标紙上或用相關軟件繪制标準曲線，並得到直線回歸方程，将樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。