兔脂聯素（ADPN）ELISA試劑盒免費代測

一、詳細參數

【産品名稱】：兔脂聯素（ADPN）ELISA試劑盒免費代測

【檢測方法】：酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

【産品性狀】：96T/48T，盒裝液體(兩種統一規格)

【貯藏條件】：2-8°C

【産品有效期】：6個月，我公司Elisa試劑盒均爲批次，可放心購買。

【産品主要成分】：酶标闆,試劑,标準品等。

【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

【産(chǎn)品單價】（具體折扣歡迎前來咨詢），可免費代測(cè)，含稅含運費。

【标本】血清、血漿(jiāng)、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦(nǎo)脊髓、心房水、胸房水、組織等

注：标本必須爲液體(tǐ)，不含沉澱(diàn)。

二、四大特性

1．特異性強：不與其它細胞因子反應。

2．重複性好：闆内、闆間變異系數均小於10%。

3．穩定性高：實驗效果很穩定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小於1号标準品，稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值爲0.990。

三、具體操作方法

以雙抗體夾心法爲例展示：

1、雙抗體夾(jiā)心法檢測(cè)抗原         

操作步驟如下：

1）将特異性抗體與固相載體結(jié)合，形成固相抗體。洗滌(dí)除去尚未結(jié)

合的抗體及一些雜質。

2）加入待測(cè)标本，保溫反應。标本中的抗原與固相抗體結合，形成固相抗原抗體複合物。洗滌(dí)除去其他未結合物質。

3）加酶标抗體，保溫反應。固相免疫複合物上的抗原與酶标抗體結合。*洗滌(dí)未結合的酶标抗體。此時固相載體上帶(dài)有的酶量與标本中受檢抗原的量相關。

4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成爲有色産物。通過比色，測知标本中抗原的量。在臨床檢驗中，此法适用於檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。隻要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用於包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源爲抗血清，包被和酶标所使用的抗體分别取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分别用於包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以将受檢标本和酶标抗體一起保溫反應，作一步檢測。

在一步法測定中，當标本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分别和固相抗體及酶标抗體結合，而不再形成"夾心複合物"。類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象，此時反應後顯色的吸光值（位於抗原過剩帶上）與标準曲線（位於抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結果将低於實際的含量，這種現象被爲鈎狀效應（hook effect），因爲标準曲線到達高峰後呈鈎狀彎落。鈎狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定标本中含量可異常增高的物質（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）時，應注意可測範圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鈎狀效應。

四、客戶收集樣品要求

  ·客戶(hù)需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。

  ·檢測(cè)的樣本爲細胞培養上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。

  ·樣本收集後應立即-20℃保存，若長期保存應-70℃。

  ·樣本量的要求：若一個指标做複孔檢測應不少於250ul，做單孔檢測應不少於120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。

   ·客戶的樣本收集後，立即按要求保存，切忌反複凍(dòng)融。外地客戶郵寄需要用幹冰運輸。郵寄前請與技術支持溝通確(què)認。

五、Elisa試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶标試劑 6ml×1 瓶 8 标準品（480ng/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶标包被闆 12 孔×8 條 9 标準品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封闆膜 2 張

6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

六、Elisa試劑盒标本要求

1．标本採集後盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗，可将标本放於-20℃保存，但應避免反複凍融

2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

七、操作步驟

1. 标準品的稀釋：本試劑盒提供原倍标準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

240ng/L 5 号标準品 150μl 的原倍标準品加入150μl 标準品稀釋液

120ng/L 4 号标準品 150μl 的5 号标準品加入150μl 标準品稀釋液

60ng/L 3 号标準品 150μl 的4 号标準品加入150μl 标準品稀釋液

30ng/L 2 号标準品 150μl 的3 号标準品加入150μl 标準品稀釋液

15ng/L 1 号标準品 150μl 的2 号标準品加入150μl 标準品稀釋液

2. 加樣：分别設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶标試劑，其餘各步操作相同）、标準孔、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度爲5 倍）。加樣将樣品加於酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封闆膜封闆後置37℃溫育30 分鍾。

4. 配液：将30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋後備用

5. 洗滌：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒後棄去，如此重複5 次，拍幹。

6. 加酶：每孔加入酶标試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鍾.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止液後15 分鍾以内進行。

八、兔脂聯素（ADPN）ELISA試劑盒免費代測咨詢和訂購的方法

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