猴絨毛膜促性腺激素（CG）elisa試劑盒原理

猴絨毛膜促性腺激素（CG）elisa試劑盒原理

l 本試劑盒用於(yú)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中猴絨毛膜促性腺激素（CG）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條(tiáo)件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用於(yú)臨床診斷(duàn)

實驗原理

試劑盒採(cǎi)用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被猴絨毛膜促性腺激素（CG）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入标本、标準品、HRP标記的檢測抗體，經過溫育並(bìng)*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的猴絨毛膜促性腺激素（CG）呈正相關。用酶标儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

猴絨毛膜促性腺激素（CG）elisa試劑盒原理操作步驟

1.編(biān)号：将樣品對(duì)應微孔按序編(biān)号，每闆應設陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶标試劑，其餘各步操作相同）

2.加樣：分别在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然後在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40µl，然後再加待測(cè)樣品 10µl。加樣将樣品加於(yú)酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫(wēn)育：用封闆膜封闆後(hòu)置 37℃溫(wēn)育 30 分鍾。

4.配液：将 30 倍濃縮洗滌(dí)液用蒸餾水 30 倍稀釋後備(bèi)用

5.洗滌(dí)：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置 30 秒後棄去，如此重複(fù) 5 次，拍幹。

6.加酶：每孔加入酶标試(shì)劑(jì) 50µl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑(jì) A50µl，再加入顯色劑(jì) B50µl，輕輕震蕩(dàng)混勻，37℃避光顯色15 分鍾.

10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍(lán)色立轉黃(huáng)色）。

11.測(cè)定：以空白空調零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應在加終止液後 15 分鍾以内進行。

注意事項

1．操作嚴格按照說明書進(jìn)行，本試劑(jì)不同批号組分不得混用。

2．試劑盒從(cóng)冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鍾後(hòu)方可使用，酶标包被闆開封後(hòu)如未用完，闆條應裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌(dí)液可能會(huì)有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌(dí)時不影響結果。

4． 封闆(bǎn)膜隻(zhǐ)限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物請避光保存。

6．試驗結果判定必須以酶标儀讀數爲準，使用雙波長檢測(cè)時，參(cān)考波長爲 630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuán)染物處(chù)理。終止液爲 2M 的硫酸，使用時必須注意安全。