國産猴免疫球蛋白G2（IgG2）elisa試劑盒代測

國産猴免疫球蛋白G2（IgG2）elisa試劑盒代測

l 本試劑盒用於(yú)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中猴免疫球蛋白G2（IgG2）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條(tiáo)件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用於(yú)臨床診斷(duàn)

實驗原理

試劑盒採(cǎi)用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被猴免疫球蛋白G2（IgG2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入标本、标準品、HRP标記的檢測抗體，經過溫育並(bìng)*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的猴免疫球蛋白G2（IgG2）呈正相關。用酶标儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

ELISA試劑盒組成

酶标闆、酶标記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌(dí)液、底物液A、底物液B、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照

國産猴免疫球蛋白G2（IgG2）elisa試劑盒代測操作步驟

（一）樣品準備

1.取動物全血按常規方法制備(bèi)血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周内可於(yú)2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液将待檢(jiǎn)血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對(duì)照不用稀釋。

3.濃縮洗滌(dí)液使用前應恢複至室溫使沉澱(diàn)溶解，然後用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

（二）檢驗方法

1.使用前将試劑(jì)盒置室溫30分鍾，恢複(fù)至室溫。

2.取所需用量酶标闆條，設空白對(duì)照1孔、陰性/陽性對(duì)照各2孔，未用的闆條盡(jǐn)快密封，2～8℃保存。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對(duì)照孔分别加入陰、陽性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋後(hòu)的樣品100μl。

4.混勻(yún)，置37℃反應(yīng)30分鍾。

5.扣去孔内液體，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置30秒後棄去，重複(fù)洗滌(dí)5次，拍幹。

6.每孔加酶标記(jì)物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鍾。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻(yún)，37℃避光反應(yīng)10分鍾。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，於(yú)450nm(可用630nm作參(cān)比波長）測定各孔吸光值（A值）。

ELISA注意事項

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應盡量輕緩(huǎn)，避免起泡。

2. 洗滌(dí)過(guò)程非常重要，不充分的洗滌(dí)易造成假陽性。

3. 一次加樣時間(jiān)控制在5分鍾内，如标本數量多，推薦(jiàn)使用排槍加樣。

4. 請每次測(cè)定的同時做标準曲線，做複(fù)孔。

5. 如标本中待測(cè)物質含量過(guò)高，請先稀釋後再測(cè)定，計算時請zui後乘以稀釋倍數。

6. 在配制标準品、檢(jiǎn)測(cè)溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請避光保存。

8. 不要用其它生産(chǎn)廠(chǎng)家的試劑替換試劑盒中的試劑。

問題解答

Elisa試劑(jì)盒陰性對(duì)照及陽性對(duì)照解析

Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照：陰、陽性對照若有正確(què)的結果，對試劑盒操作的結果可以有粗略的判斷(duàn)。

空白對照：對ELISA試劑來說，空白對照實際上是不加标本不加酶做對照。空白對照主要測(cè)系統的吸光率。空白對照在單波長(zhǎng)測(cè)量時顯得尤其重要

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