人基質金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）ELISA試劑盒

操作過(guò)程中可能出現的問題和解決(jué)方法

問題

可能原因

解決方法

顯色淡，靈敏度偏低

1、試劑(jì)盒在運輸途中時間太長(zhǎng)，溫度太高

盡(jǐn)量縮短運輸時間(jiān)，夏季應放冰塊降溫

2、試劑盒未充分平衡

試劑盒從2～8℃冰箱取出後打開盒蓋，於(yú)室溫平衡至少20分鍾，確(què)保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。

3、培養箱溫度不足37℃

注意培養箱溫度，放入反應闆後(hòu)盡量減(jiǎn)少開啓次數以免影響溫度恒定，非隔水式培養箱尤其應注意

4、保溫時間不足

校正定時鍾準確定時

5、洗滌時沖(chōng)擊力太大、浸泡時間過長(zhǎng)、洗滌次數增加

按說明書要求保留洗滌(dí)時間，準確(què)記住洗滌(dí)次數

6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清潔(jié)

校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊(jǐn)密，吸嘴内壁要清潔(jié)，一次性使用

7、蒸餾水水質有問題

使用新鮮合格的蒸餾水

8、底物作用時間不足

準確定時

背景深，全部呈有色

1、洗滌(dí)不充分，洗後未拍幹，樣品中其它成分殘(cán)留或酶标記物殘(cán)留

濃縮洗液準確(què)配制；10倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶於(yú)室溫全部溶解後再量取稀釋；充分洗滌，*拍幹。加樣或加酶拍闆的濾紙應棄去不用，不要反複使用，否則易造成污染

2、樣品污染

樣品應新鮮採(cǎi)集，或低溫(wēn)保存，防止污染

3、培養箱溫度超過(guò)37℃或反應時間過(guò)長(zhǎng)

調整培養箱溫度，準確定時

4、吸嘴重複(fù)使用，未洗淨(jìng)或消毒不*

吸嘴盡可能一次性使用

5、蒸餾水被污染

使用新鮮蒸餾水

6、酶等試劑混用

不同批号試劑勿混用

7、一次實驗的标本量過多，加樣時間太長(zhǎng)，導(dǎo)緻實際反應時間延長(zhǎng)

合理安排實驗，避免幾(jǐ)塊(kuài)酶标闆同時加樣

重複性不佳

1、樣品數量多少不一，加樣時間(jiān)有長(zhǎng)有短

重複(fù)某一樣品時，加樣時間(jiān)盡可能與*次接近

2、保溫時間(jiān)不*，洗滌(dí)條件不*，操作人員不*

重複(fù)測(cè)定标本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持*，以排除這些因素造成的不*的可能性

3、加樣量不*

樣品稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器並(bìng)裝緊(jǐn)吸嘴

出現白闆,陽性對照不顯色

顯色液變質

更換新的顯色液

洗滌液配制有誤

請(qǐng)按說明書所示稀釋(shì)倍數配制

未加酶結合物而認爲已加入

注意不要漏加

終止液誤作洗滌(dí)液稀釋或當(dāng)底物液使用

每次加液前均應看清标簽