做ELISA實驗時,大家都知道樣本要進行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會導(dǎo)緻線性關系不理想,結果也就不準瞭(le)。那麽,如何從标準曲線中通過樣本的吸光度計算樣本中的蛋白含量?方法很簡單,隻需三步驟,輕輕松松搞定。
1. 設立标準品,以不同濃(nóng)度标準品的吸光度爲縱坐标,濃(nóng)度爲橫(héng)坐标建立坐标系,求出曲線方程y=ax+b,
2. 得出回歸(guī)方程 x=(y-b)/a
3. 所得樣品吸光度代入方程即可取得所檢(jiǎn)測(cè)的濃度
Elisa檢測(cè)中,包被酶标版所用的抗體量,可以用公式計算:V=5n/a(單(dān)位:ul),a:抗體濃度,n:酶标闆數量。