血清，指血液凝固後，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結合蛋白、提供促接觸(chù)和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞的起到某些保護作用。
我司技術部歐陽老師根據多年經驗總結血清的保存應該(gāi)注意以下幾點(diǎn)：
(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲存於(yú)-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由於(yú)血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.
(2)熱滅活是指56℃, 30分鍾加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因爲熱處理會造成血清沉澱物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補(bǔ)體參(cān)與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小闆釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化.
(3)瓶裝血清解凍需採(cǎi)用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然後移入室溫,待全部溶解後再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉澱的發生.切勿直接将血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變(biàn)太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉澱.
(4)一般廠(chǎng)商提供的血清爲無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現血清有懸浮物,則可将血清加入培養液内一起過濾,切勿直接過濾血清.
(5)血清中的沉澱物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變(biàn)性及解凍後血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鍾去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉澱物的形成會顯著增多.有些沉澱物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認爲血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批号的血清.
(6)切勿将血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變(biàn)得渾濁,同時血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質量.
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