化學發光免疫測定技術

      化學發光免疫測定技術，化學發光免疫測定（chemiluminesent immunoaay，CLIA）是免疫測定技術繼酶免技術（EIA）、放免技術（RIA）、熒光免疫技術（FIA）和時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）之後發展的一項新興測定技術。

化學發光酶免疫測定（chemiluminescent enzyme immunoaay，CLEIA）從标記物性質來看應屬酶免疫測定。CLEIA測定中的兩次抗原抗體反應步驟均與酶免疫測定相同，僅zui後一步酶反應所用的底物爲發光劑而非顯色劑。CLEIA中常用的兩種标記酶是HRP和ALP，其原理如下。
，HRP标記的CLEIA
HRP标記的CLEIA常用的底物爲魯米諾或其衍生物。魯米諾的氧化反應在堿性緩沖液中進行，通常以pH8．6的0．1mol／LTrig緩沖液作底物液，當HRP與魯米諾在堿性環境下發生氧化反應時，魯米諾将能量轉移並zui終以發射光子的形式釋放，而光的強度與被測物的濃度成正比；此外，HRP催化魯米諾氧化的反應可被某些酚試劑（如鄰碘酚）或螢火蟲熒光素酶等加強。加強劑的作用是增強發光和延長發光時間，由此可提高檢測的敏感度。
，ALP标記的CLEIA
在以ALP爲标記酶的CLEIA中，應用的底物一般爲adamantyl dioxetase phohate及其衍生物如D等。當ALP與底物相互作用時，ALP使底物由能量基态轉變爲激發态，當非穩态的底物以光子形式将能量轉移，並回到基态時，其發光的強度則與被測物的濃度成正比，因此測定反應産物的發光強度即可獲得被測物的濃度。
      基本原理是将化學發光系統與免疫反應相結合，以檢測樣本中的抗原或抗體，由於它既具有免疫反應的高度特異性，又具有發光反應的高敏感性，且對環境公害小，因此近年來已被國内外臨床實驗室及科研單位，廣泛應用於各種激素、特種蛋白及藥物的監測和分析。
化學發光分析技術根據其标記物的不同可大緻分爲3大類：化學發光酶免疫測定、化學發光标記免疫測定、電化學發光免疫測定。