恒遠産品文獻:TGF-β,VEGF,EGF試劑盒引用文獻

複方苦參黃柏溶液經氧驅動霧化對急性創傷修複模型大鼠EGF、VEGF、TGF-β的影響
窦群立1，袁韓濤2，黃雅松2，申海濱2
（1．陝西中醫藥大學附屬醫院，陝西 鹹陽 712000；2．陝西中醫藥大學，陝西 鹹陽 712000）

【摘要】目的 探讨複方苦參黃柏溶液經氧驅動霧化對急性創傷修複模型大鼠EGF、VEGF、TGF-β的影響。方法 選取SPF級成熟年齡SD大鼠75隻，随機分成五組，各15隻：生理鹽水組、複方苦參黃柏溶液組、氧療組、複方苦參黃柏溶液+氧療組、康複新液組。适應性喂養1周後進行造模，並(bìng)於(yú)造模成功之後的第2天開始給藥，在造模後的第3天、第7天、第10天、第14天觀察創面組織學的改變。在第3天、第7天、第14天對創面進行标本採集，用ELISA檢測标本中EGF、VEGF、TGF-β的含量。結果 創面組織學生長情況：在檢測的同一時期，複方苦參黃柏溶液+氧療組成纖維細胞數量，新生毛細血管，膠原纖維等生長明顯強於(yú)其餘四組，差異有統計學意義（P＜0.05）。生理鹽水組差，其餘三組介於(yú)三者之間且差異不大。标本中EGF、VEGF、TGF-β含量檢測情況：在檢測的同一時段，複方苦參黃柏溶液+氧療組EGF、VEGF、TGF-β含量明顯高於(yú)其餘四組，差異有統計學意義（P＜0.05），生理鹽水組EGF、VEGF、TGF-β含量低，其餘三組EGF、VEGF、TGF-β含量介於(yú)三者之間且差異不大。結論 複方苦參黃柏溶液經氧驅動霧化對急性創傷修複模型大鼠的創面修複有促進作用、亦可提高組織中EGF、VEGF、TGF-β的含量，且三者對創面的修複可能具有相關性。

【關鍵詞】複方苦參(cān)黃柏溶液；氧驅動霧化；創(chuàng)傷修複；EGF；VEGF；TGF-β

【中圖(tú)分類(lèi)号】R856.2

【文獻标識碼】B

【文章編号】ISSN.2095-6681.2018.12.192.03
當前經濟化的高速的發展，創傷的發病情況成爲心髒病、腦血管病、腫瘤疾病之後，導緻人類傷殘甚至死亡第四個原因[1]。本實驗從傳統中藥聯合局部氧療治療創傷修複的思路出發，結合傳統中藥與氧療的方法，創新氧驅動中藥霧化局部外治的新型治療方法，實驗研究複方苦參黃柏溶液氧驅動霧化外治對創傷修複模型大鼠的治療作用，並對其作用機理進行初步探讨，以期爲治療創傷皮膚修複提供新方法，並爲新治療方法提供實驗依據。現将實驗方法及結果報道如下。
1 材料與方法
1.1 動物
清潔級SD大鼠75隻，雄性，體重大約在200～250 g，由第四軍醫大學實驗動物中心提供（動物合格證号：SCXK（軍）2012-0007），在實驗動物中心适應性飼養1周。
1.2 藥物與試劑
複方苦參黃柏溶液的組成有：苦參30 g、黃柏20 g、蒼術15 g、艾葉10 g、重樓25 g、花椒12 g。由陝西中醫藥大學附屬醫院中藥房提供，飲片經提純加工成每10 mL相當於原藥材3.5 g的溶液，由陝西中醫藥大學附屬醫院制劑中心提制備。康複新液由四川好醫生攀西藥業有限責任公司提供。TGF-β、VEGF、EGF試(shì)劑(jì)盒由上海恒遠生物科技有限公司提供。
1.3 主要儀器
離心機，KDC-40（科大創新股份有限公司中佳分公司）；酶标儀，RT-6000（深圳雷杜生命科學股份有限公司）；自動組織包埋機，STD-30（德國萊卡公司）；組織切片機，KHF-524（德國萊卡公司）等。
1.4 方法
1.4.1 造模
造模前大鼠背部脫毛、稱重，腹腔注射10%戊巴bi妥鈉3.5 ml/kg麻醉後，消毒鋪巾，在脊旁0.5 cm兩側，各作一個1.6*1.6 cm2矩形标記，切除全層皮膚，止血後用無菌紗布包紮，常規飼養。
1.4.2 分組及換藥
造模完成後，利用随機法分組。造模成功後第2天，按文獻方法折算大鼠用藥量 [2]。模型組：15隻，每天用生理鹽水濕敷創面20 min。中藥組：15隻，每天用複方苦參黃柏溶液濕敷創面20 min。氧療組：15隻，每天局部氧療20分鍾。
4.康複新液組：15隻，每天用康複新液濕敷創面20 min。中藥氧療組：15隻，每天用氧驅複方苦參黃柏溶液霧化創面20 min。霧化步驟：10 ml複方苦參黃柏溶液加入儲藥罐内，通過連接霧化嘴、霧化器儲藥罐、吸入管與氧氣導管作爲霧化管道，調節氧氣裝置直至儲藥罐有霧化液氣出現，用霧化液氣對創面進行治療。換藥每天1次，共14天，各組治療完成後用無菌敷料包紮創面。
1.4.3 取材
對創面幹預後第3、7、14天。每組5隻大鼠，消毒，鋪巾，切除全層皮膚不傷及皮下脂肪及深筋膜，採取标本後頸椎脫臼處死實驗動物。标本一部分稱取重量，加入一定量的磷酸緩沖鹽溶液（PBS），備用。使用時，用勻漿器将标本和PBS的混合物研磨充分。用離心機在轉速爲2000～3000轉/分下保持20 min後移液槍收集上清液等待檢測各項指标。标本融化後仍然保持2～8℃的溫度，使用EGF、VEGF和TGF-β試劑盒進行細胞因子水平檢測；另一部分放在10%福爾馬林溶液中固定24 h，然後脫鈣48 h備用，後期做石蠟切片。

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