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人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒含量

  • 發布日期:2016/10/9      浏覽次數:740
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                 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒

     

    l 本試劑盒用於(yú)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)的含量。

    l 有效期:6個(gè)月

    l 保存條(tiáo)件:2-8℃

    l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用於(yú)臨床診斷(duàn)

     

    實驗原理

    試劑盒採(cǎi)用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入标本、标準品、HRP标記的檢測抗體,經過溫育並(bìng)*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)呈正相關。用酶标儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

     

    樣本處理及要求

    1.  血清:全血标本請於室溫放置2小時或4℃過一夜後於1000g離心20分鍾,取上清即可檢測,或将标本放於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。
    2.  血漿:可用EDTA或肝素作爲抗凝劑,标本採集後30分鍾内於2 - 8°C 1000g離心20分鍾,或将标本放於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。

    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重後将組織剪碎。将剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要适當調整,並(bìng)做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,於冰上充分研磨。爲瞭(le)進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反複凍融。zui後将勻漿液於5000×g離心5~10分鍾,取上清檢測。

    4.  細胞培養物上清或其它生物标本:1000g離心20分鍾,取上清即可檢測,或将标本放於-20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。
    注:标本溶血會影響zui後檢測結果,因此溶血标本不宜進行此項檢測。


    标本處理

    1.  本公司隻對(duì)試劑盒本身負(fù)責,不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。

    2.  實驗前應預測(cè)标本含量,如果标本濃度過高,應對(duì)标本進行稀釋,使稀釋後的标本符合試劑盒的檢測(cè)範圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。标本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。

    3.  若所檢(jiǎn)樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,並(bìng)注意留存樣本。

    4.  使用化學裂解液制備(bèi)的組織勻漿或細胞提取液可能會由於(yú)某些化學物質的引入導緻ELISA實驗結果偏差。

    5.  若樣本爲細胞培養上清,因該類樣本幹擾因素較多,如:細胞狀态、細胞數量、採(cǎi)樣時間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。

    6.  某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因爲與本産(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。

    7.  建議使用新鮮樣本,保存時間過長(zhǎng)可能會存在蛋白降解或變(biàn)性導緻實驗結果偏差。