操作過(guò)程中可能出現的問題和解決(jué)方法 |
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
顯色淡，靈敏度偏低 | 1、試劑(jì)盒在運輸途中時間太長(zhǎng)，溫度太高 | 盡(jǐn)量縮短運輸時間(jiān)，夏季應放冰塊降溫 |
| 2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2～8℃冰箱取出後打開盒蓋，於(yú)室溫平衡至少20分鍾，確(què)保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。 |
| 3、培養箱溫度不足37℃ | 注意培養箱溫度，放入反應闆後(hòu)盡量減(jiǎn)少開啓次數以免影響溫度恒定，非隔水式培養箱尤其應注意 |
| 4、保溫時間不足 | 校正定時鍾準確定時 |
| 5、洗滌時沖(chōng)擊力太大、浸泡時間過長(zhǎng)、洗滌次數增加 | 按說明書要求保留洗滌(dí)時間，準確(què)記住洗滌(dí)次數 |
| 6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清潔(jié) | 校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊(jǐn)密，吸嘴内壁要清潔(jié)，一次性使用 |
| 7、蒸餾水水質有問題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 |
| 8、底物作用時間不足 | 準確定時 |
背景深，全部呈有色 | 1、洗滌(dí)不充分，洗後未拍幹，樣品中其它成分殘(cán)留或酶标記物殘(cán)留 | 濃縮洗液準確(què)配制；10倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶於(yú)室溫全部溶解後再量取稀釋；充分洗滌，*拍幹。加樣或加酶拍闆的濾紙應棄去不用，不要反複使用，否則易造成污染 |
| 2、樣品污染 | 樣品應新鮮採(cǎi)集，或低溫(wēn)保存，防止污染 |
| 3、培養箱溫度超過(guò)37℃或反應時間過(guò)長(zhǎng) | 調整培養箱溫度，準確定時 |
| 4、吸嘴重複(fù)使用，未洗淨(jìng)或消毒不* | 吸嘴盡可能一次性使用 |
| 5、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 |
| 6、酶等試劑混用 | 不同批号試劑勿混用 |
| 7、一次實驗的标本量過多，加樣時間太長(zhǎng)，導(dǎo)緻實際反應時間延長(zhǎng) | 合理安排實驗，避免幾(jǐ)塊(kuài)酶标闆同時加樣 |
重複性不佳 | 1、樣品數量多少不一，加樣時間(jiān)有長(zhǎng)有短 | 重複(fù)某一樣品時，加樣時間(jiān)盡可能與*次接近 |
| 2、保溫時間(jiān)不一緻，洗滌(dí)條件不一緻，操作人員不一緻 | 重複(fù)測(cè)定标本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一緻，以排除這些因素造成的不一緻的可能性 |
| 3、加樣量不一緻 | 樣品稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器並(bìng)裝緊(jǐn)吸嘴 |
出現白闆,陽性對照不顯色 | 顯色液變質 | 更換新的顯色液 |
| 洗滌液配制有誤 | 請(qǐng)按說明書所示稀釋(shì)倍數配制 |
| 未加酶結合物而認爲已加入 | 注意不要漏加 |
| 終止液誤作洗滌(dí)液稀釋或當(dāng)底物液使用 | 每次加液前均應看清标簽 |
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