ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)争抑制法,其中競(jìng)争抑制法(HBeAb,HBcAb等採(cǎi)用)因受操作時差所引起的不公平競争等因素的影響,結果重複(fù)性較(jiào)差,質量較(jiào)難控制。不同批次的ELISA試劑(jì)在制作過(guò)程中很難保證質量*一緻,即使是通過(guò)批批檢的項目其檢測(cè)結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批号的試劑,並(bìng)保證保存條件。嚴格執行這一标準可以避免因試劑(jì)批号改變(biàn)而重新建立質控體系及重新評估試劑的複雜過程,並(bìng)且能夠保證結果的穩定性;對於(yú)效期短、使用率低的試劑,應當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反複凍(dòng)融造成試劑的失效。下面上海勁馬生物就根據Elisa試劑盒的三種常見檢測方法分析?下具體原理。歡迎參考學習。
問:什麽是競争性ELISA?
答:競争ELISA基於(yú)競争結合技術,即樣本中的待測分子與固定量的标記的同樣分子(我們一般用堿性磷酸酶作爲标記)同時與固定在孔闆上的抗體的同一結合位點進行競争,參(cān)照标準曲線,試驗數據值是定量的。
問:什麽是夾心ELISA?
答:夾層ELISA採(cǎi)用對樣本中分析物的特異的抗體作爲固定化的捕獲抗體,然後用第二個帶标記的抗體作檢測,檢測抗體對分析物也是專一的。當參(cān)照标準曲線時,試驗數據值是定量的。
問:什麽是直接ELISA?
答:直接ELISA是将被測(cè)的分析物直接包膜在微孔闆表面,然後用測(cè)試抗體來證實被測(cè)分析物的存在。當與重組蛋白(标準曲線)進行參(cān)照時,試驗數據值是半定量的。