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ELISA檢測結果準確可靠的必要條件有三點

  • 發布日期:2015-05-18      浏覽次數:1410
    • 的試劑,良好的儀器和正確(què)的操作是保證ELISA檢測(cè)結果準確(què)可靠的必要條件。嚴格遵照規定操作,必能得出準確(què)的結果。

      一、樣本要求:可用作ELISA測定的标本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排洩物(如尿液、糞便)等均可作标本以測定其中某種抗體或抗原成份。大部分ELISA檢測均以血清爲标本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等於(yú)血清。制備(bèi)血漿标本需借助於(yú)抗凝劑,而血清标本隻要待血清自然凝固、血塊收縮後即可取得。在ELISA中血漿和血清可同等應用。

      二、樣本收集方法:血清标本可按常規方法採(cǎi)集,應注意避免溶血。血清标本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有内源性HRP,也會産生假陽性反應。一般說來,在5天内測定的血清标本可放置於(yú)4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解後,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下颠倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。反複凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清标本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自採(cǎi)集時就應注意無菌操作,也可加入适當防腐劑。

      三、加樣:在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加标本,加酶結合物,加底物。加樣時應将所加物加在LEISA闆孔的底部,避免加在孔壁上部,並(bìng)注意不可濺出,不可産(chǎn)生氣泡。