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恒遠生物|大鼠氣管上皮細胞 RTE 培養建議

  • 發布日期:2025-11-24      浏覽次數:353
    • 品牌: 恒遠生物

      貨(huò)号: HYCC30021
      中文名稱(chēng):大鼠氣(qì)管上皮細胞;RTE
      英文名稱:RTE
      規格:T25
      形态特性:多角
      生長特性:貼壁生長
      培養(yǎng)條(tiáo)件:MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  20%FBS 
      傳(chuán)代方法:1:3傳(chuán)代,3-4天換(huàn)液一次
      凍(dòng)存條(tiáo)件:無血清細胞凍(dòng)存液
      特别說明:本庫的細胞系(株)僅用於(yú)科研工作,未經許可不得用於(yú)其他目的。使用者不得将本庫細胞系(株)轉讓給(gěi)第三者。

      一、細胞收到後處理
      細胞在培養瓶中培養至良好狀态後灌滿培養液並(bìng)封好瓶口是細胞運輸的常見辦(bàn)法。收到細胞回到自己的實驗室後,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台内,嚴格無菌操作,培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%彙合度時,可将瓶裝的培養液收集至離心管中,加入6ml培養基,放入37℃、孵箱培養;超過80%彙合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。(注意發貨的是密封培養瓶的話,處理完後放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松,傳代後建議一瓶用原瓶裏面的培養基,另外一瓶用自己配的培養基),若是5%CO2的培養箱,可用密封培養瓶,擰緊瓶蓋後放入5%CO2培養箱,48H内要換液一次。

      二、細胞培養常見問題解答

      1.培養基爲什麽(me)一般都是偏紅(hóng)色?
      因爲培養基加瞭(le)酚紅來顯示顔色,指示pH範圍爲6-8,顔色會由黃變(biàn)爲紫紅。這是爲瞭(le)我們能更直觀觀察培養液的變(biàn)化,如變(biàn)黃,則代表偏酸,偏堿性瞭(le)就顯示偏紫色。一般來說,細胞吸收營養後,變(biàn)黃後就暗示我們要換培養基啦!所以密切觀察很重要哦!

      2.細胞的居住環境
      舒适無菌的環境是細胞健康生活的重要基礎(chǔ)。如下圖爲培養細胞的器皿,包括形狀、規(guī)格、用途多樣的培養瓶、培養皿及培養闆。最終住進37℃,5%CO2的恒溫培養箱。

      3.細(xì)胞培養皿和培養瓶區(qū)别?
      就細胞培養狀态來說,培養瓶和培養皿沒有太大區别,主要在於(yú)安全系數(培養瓶>培養皿)、培養細胞數量(大培養瓶>培養皿)。但是培養瓶成本也會相對(duì)較高,因此無特殊要求,一般選擇培養皿即可。

      4.爲什麽細胞複(fù)蘇後(hòu),很多難以貼壁?
      忽略培養基的問題,主要考慮細胞凍存時狀态差或者複蘇時動(dòng)作太慢導(dǎo)緻細胞死亡。切記最重要的融化速度要快,可不時搖動(dòng)冷凍管,使之盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。

      5.細胞凍(dòng)存時對(duì)細胞量有要求嗎?
      細胞複(fù)蘇時會有一定的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,起始濃度106—107個(gè)/ml/管。

      6.細胞污染怎麽辦?
      如發現細胞有污染,一般建議丢棄。如果細胞非常寶貴,可試著(zhe)加入含抗生素的培養基反複清洗,並(bìng)用抗生素含量高的培養基培養,並(bìng)經常更換培養基。

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