什麽是細胞“消化”?

人需要消化，細胞也是需要消化的，那細胞消化的方法你知道幾(jǐ)種？和小編(biān)一起來看看吧！

 
一、離子螯合劑：不破壞細胞表面分子，僅與CAMs螯合，因此，如果檢測(cè)細胞表面分子的話(huà)，盡量，甚至是一定不要用酶消化法。
 
1、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用於(yú)細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。
 
2、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單(dān)細胞懸液的能力確(què)實比較強。
 
二、物理法：直接吹打或用細(xì)胞刮子将細(xì)胞刮下來(lái)。
 
三、冷凍法：
 
此方法僅能用於(yú)細胞傳(chuán)代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，是因細胞冷凍後收縮，從而從培養瓶上脫落下來。
 
優點：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些貼壁不是特别緊，又特别嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用於(yú)因用其它方法傳(chuán)代導緻大量細胞死亡操作的間充質幹細胞、DC細胞的培養，效果非常滿意。
 
具體過程是：
1.用較(jiào)多的4度的PBS洗滌(dí)一遍細胞(以6孔闆爲例，加1.5ml/孔)。
2.再加0.5ml 4度的PBS，靜(jìng)置操作台上，很快細胞就小片脫(tuō)落。
3.輕(qīng)輕(qīng)吹打，細胞即脫(tuō)落。
4.按一定比例傳代。
 
四、酶消化法。
 
1、胰酶。這是用得zui多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鍾到幾十分鍾不等。0.25%的胰酶作用於(yú)單層貼壁的細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鍾就足夠瞭(le)。終止是用血清。主要作用於(yú)細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存於(yú)-20度。
 

2、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養時，從(cóng)組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對(duì)細胞損傷較小，但是，價格也較貴。

 

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