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人白介素23試(shì)劑(jì)盒操作步驟

  • 發布日期:2011-09-19      浏覽次數:2050
    •       人白介素23試(shì)劑(jì)盒操作步驟

       

      本試劑盒僅供研究使用。
      檢測範圍:                                                          96T
      200 ng/L -5000 ng/L
       
      使用目的:
      操作步驟
      1.         标準品的稀釋:本試劑盒提供原倍标準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      5000ng/L
      5号标準品
      150μl的原倍标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
      2500 ng/L
      4号标準品
      150μl的5号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
      1250 ng/L
      3号标準品
      150μl的4号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
      625 ng/L
      2号标準品
      150μl的3号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
      312.5 ng/L
      1号标準品
      150μl的2号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液

       2.         加樣:分别設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶标試劑,其餘各步操作相同)、标準孔、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度爲5倍)。加樣将樣品加於酶标闆孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      3.         溫育:用封闆膜封闆後置37℃溫育30分鍾。  
      4.         配液:将20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用
      5.         洗滌:小心揭掉封闆膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
      6.         加酶:每孔加入酶标試劑50μl,空白孔除外。
      7.         溫育:操作同3。
      8.         洗滌:操作同5。
      9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
      10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
      11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以内進行。

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