人白介素23試(shì)劑(jì)盒操作步驟
本試劑盒僅供研究使用。
檢測範圍: 96T
200 ng/L -5000 ng/L
使用目的:
操作步驟
1. 标準品的稀釋:本
試劑盒提供原倍标準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
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5000ng/L
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5号标準品
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150μl的原倍标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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2500 ng/L
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4号标準品
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150μl的5号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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1250 ng/L
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3号标準品
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150μl的4号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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625 ng/L
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2号标準品
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150μl的3号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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312.5 ng/L
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1号标準品
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150μl的2号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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2. 加樣:分别設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶标試劑,其餘各步操作相同)、标準孔、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度爲5倍)。加樣将樣品加於酶标闆孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封闆膜封闆後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液:将20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用
5. 洗滌:小心揭掉封闆膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6. 加酶:每孔加入酶标試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以内進行。
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